蛋?质组(Proteome)?词源于蛋?质(protein)与基因组(genome)两个词的组合,意指“?种基因组所表达的全套蛋?质”,即包括?种细胞乃??种?物所表达的全部蛋?质。蛋?质组与转录组有许多相似之处,也具有时空特异性,会随着环境、组织或个体的改变?改变。
IP(免疫沉淀):是利?抗原抗体特异性反应纯化富集?的蛋?的?种?法。
co-IP(免疫共沉淀):可对两种已知蛋?是否存在相互作?进?验证,也可以验证在总蛋?中是否含有与已知蛋?相互作?的未知蛋?。
Pulldown:带标签的诱饵蛋?能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获,形成“次级亲和?持物”,?于纯化与诱饵蛋?相互作?的其他蛋?。可?来证明两种已知蛋?间存在的相互作?或寻找与已知蛋?直接发?相互作?的未知分?。
蛋?质组学本质上指的是在?规模?平上研究蛋?质的特征,包括蛋?质的表达?平,亚细胞定位,翻译后的修饰,蛋?与蛋?相互作?等,由此获得蛋?质?平上的关于疾病发?、细胞代谢、??发育以及各种胁迫反应等过程的整体?全?的认识。
Western Blot采?的是聚丙烯酰胺疑胶电泳,待检测物是蛋?质,“探针”是抗体,“显?”?标记的?抗。SDS-PAGE可对蛋?质样品进?分离,转移到固相载体,例如硝酸纤维素薄膜(NC)上。固相载体可以吸附蛋?质,并保持电泳分离的多肽类型及其?物学活性 变。转移后的NC膜就称为?个印迹(blot)。?蛋?溶液(如5%BSA)处理,封闭NC膜上的疏?结合位点。??标蛋?的抗体(?抗)处理NC膜(只有待研究的蛋?质才能与ー抗特异结合形成抗原抗体复合物),这样清洗除去未结合的?抗后,只有在?标蛋?的位置上结合着?抗。??抗处理过的NC膜再?标记的?抗处理(?抗是指?抗的抗体),处理后,带有标记的形成抗体复合物可以指??抗的位置,即是待研究的蛋?质的位置。