作为连接基础科学与临床应用的桥梁,血液分析为科研人们提供了探索疾病机制、监测治疗效果的窗口。然而,血液样本的采集、处理和储存过程中的微小差异,都可能导致研究结果的巨大偏差。为了确保研究的准确性和可重复性,我们有必要深入理解并掌握血液样本的正确处理方法。在这里,小编将细致展开血液样本的采集和处理流程,包括但不限于采血管的选择、抗凝剂的使用、样本的分离、储存条件等关键步骤。
将血液采集到含有抗凝剂的采血管中所形成的混合物,包括血细胞(如红细胞、白细胞和血小板等)和血浆的所有成分。
在采集血液样本时,科研人员必须明确区分血浆和血清。两者均为血液的液体部分,但在成分和制备方法上存在显著差异。
定义:全血经抗凝处理后,通过离心获得的不含细胞成分的淡黄色透明液体。
成分:主要包括水(约90%)、蛋白质(如白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原等)、电解质、营养物质、激素和废物。
特点:含有纤维蛋白原和凝血因子。
定义:全血凝固后,离心分离出来的淡黄色透明液体。
成分:与血浆成分相似,但不含纤维蛋白原和凝血因子。
特点:纤维蛋白原转变为纤维蛋白,形成血凝块,血清则为血凝块形成后剩余的液体部分。
根据试验需求选择采血管类型:
血液采集需通过伦理审查。采样前准备好采血所需材料和设备,并确保所有材料和设备都是无菌,可以随时使用。
使用血清管采集静脉血样本,采集后立即轻轻颠倒摇匀5-8次,使促凝剂和血样充分混匀,促进血液凝固。保持标本管垂直、管口向上放置。样本于室温(22-25℃)中静置30-60 min,待血液完全凝固。
使用含有抗凝剂的血浆收集管采集静脉样本,采集后立即轻轻颠倒摇匀5-8次,确保抗凝剂和血样充分混匀。保持标本管垂直、管口向上放置。
注:收集的全血需尽快处理成血清/血浆;若不能及时处理,放置于2℃-6℃保存,保存时间不易超过35d。
血液采集时,应避免溶血现象,采集时应注意:静脉采血时,抽血速度不易过快;一次性采血量不宜过少;采集的全血不宜激烈振荡;离心转速不宜过大。
血清样本在室温静置30-60min后可离心分离,血浆于收集后可立即离心分离出血浆。
离心条件:在1200g下,4℃下离心10min,小心收集上层淡黄色透明溶液,避免扰动红细胞和白细胞层。
将收集的血浆/血清按需分装,在-20℃或-80℃下储存。
储存温度:2℃-8℃;保存期:<48h
全血不能冻融;
已分离的血清/血浆,在室温条件保存不宜超过8h;如果试验在8h内不能完成,血清/血浆应转入2℃-8℃保存。
温度条件:
短期储存:若存放于4℃,请勿超过一个月。
长期储存:血清/血浆应保存在-20℃或-80℃温度下。长时间储存在2-8℃可能导致血清中的各种蛋白和脂蛋白聚集而形成沉淀或可见的混浊。
避光储存:血清/血浆应避免暴露在阳光直接照射下,以防止光照对样品造成不良影响。
冷冻状态解冻时,应先将血清置于2-8℃冰箱融解,然后在室温下全融。注意解冻过程中避免直接由-20℃或-80℃直接至室温下解冻,因为温度改变太大容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。同时,应避免反复冻融,因为反复冻融会破坏血清中的蛋白质结构。
温度条件:
短期储存:若存放于2-8℃条件下,请勿超过一个月,以避免代谢物发生变化。
长期储存:血清/血浆应保存在-80℃的低温条件下,以维持代谢物的稳定性。使用-80℃冰箱或液氮罐等设备可以确保样本在长时间的储存中保持稳定。
避光储存:血清/血浆应避免暴露在阳光直接照射下,以防止光照对样本造成不良影响。
从冷冻状态解冻时,应先将血清/血浆置于2-8℃冰箱或冰上缓慢进行。注意解冻过程中避免直接由-80℃直接至室温下解冻,因为温度改变太大容易造成代谢物发生变化。
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